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同一池蝦苗兩次抽樣出現(xiàn)不同檢測結(jié)果!問題何在?
發(fā)布日期:2019-04-16
瀏覽次數(shù):3134

選對了蝦苗,養(yǎng)蝦就相當(dāng)于成功了一半。隨著人們對蝦苗認(rèn)識(shí)的深入,蝦苗檢測也逐漸成為養(yǎng)殖戶選購蝦苗的重要參考。蝦苗病原的檢測已經(jīng)成為企業(yè)自檢、行業(yè)監(jiān)管的一個(gè)重要手段。最近,有養(yǎng)殖戶提出疑問,一個(gè)批次不同的樣本為什么會(huì)有陰、陽兩種結(jié)果?一個(gè)池號(hào)的兩個(gè)樣本為什會(huì)有陰、陽兩種檢測結(jié)果?是不是檢測不準(zhǔn)確了呢?

檢測的目的就是想知道是這個(gè)池里的蝦苗帶不帶病原(以肝腸胞蟲為例),也就是說這個(gè)池中的苗是陽性還是陰性。在想知道這個(gè)結(jié)果前,我們應(yīng)該先掌握一點(diǎn)相關(guān)知識(shí)。

同一池苗兩次抽樣出現(xiàn)不同的檢測結(jié)果,一種原因就是樣品的問題,第二可能是檢測工作質(zhì)量的問題。

肝腸胞蟲檢測

| 關(guān)于樣品的問題 |

對于同一苗池,蝦苗帶蟲的情況有這樣幾種:一是池中每一只苗都是陰性,即0%陽性;二是每一只苗都是陽性,即100%陽性;三是同一池中有的苗為陽性,有的苗為陰性,也就是說陽性率在0-100%之間。從研究的情況來看,較多的池苗屬于第三種情況,也就是說并不只是全池苗都是陰性或都是陽性,有時(shí)同一池中有陽性和陰性苗共存。這主要是因?yàn)橥怀氐拿绮⒉皇莵碓从谝恢挥H蝦,或者同一池中的不同個(gè)體存在免疫力差異的原因。對于第三種情況來說,我們很難測出具體該池中陽性苗的百分率。

檢測有兩種,一種是全檢,如我們買的汽車,出廠時(shí)是每輛都檢測,這在實(shí)際工作中可以做到;第二種是抽樣,象糧食、蝦苗等,實(shí)際工作中無法做到每一個(gè)體檢測。由于是抽取一定的樣品來代替整池苗的情況,所以檢測的結(jié)果就有可能存在偏差。如果檢測要獲得100%可信度,那就需將池中每一只苗都拿出來檢測,這顯然不可能做到。抽檢只能從池中抽取極少一部分樣品來代表。

關(guān)于抽樣樣品的代表性問題,同一個(gè)池中上百萬的苗只抽了幾百只,檢測時(shí)也只檢測其中的更少數(shù)個(gè)體,要想保證檢測結(jié)果一致很難做到。試想一下,假設(shè)同一池中蝦苗攜帶肝腸胞蟲的實(shí)際比例(陽性率)是2%,一次從池中隨機(jī)抽取200只苗,很難保證每一次都能抽樣并檢測到帶蟲的個(gè)體。因此,兩次抽樣檢測出現(xiàn)不同結(jié)果就不難理解了。

為了使檢測結(jié)果代表整池的可信度相對高,國家在動(dòng)物疫病檢測樣品的抽取方面有技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)可以參考,按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)來抽樣檢測,依據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)原理,可以獲得較高可信度的檢出結(jié)果來代表整體(全池),目前我們就是按照這樣的標(biāo)準(zhǔn)來實(shí)施的,也是按照這樣的方法來報(bào)告結(jié)果的,只不過用檢測的結(jié)果來代表全池的情況的可信度達(dá)不到100%(只有每一只苗都檢測的結(jié)果才達(dá)到100%)。

多數(shù)養(yǎng)殖戶理解結(jié)果為陰性就代表該池中一定沒有帶蟲苗,陽性就代表該池中所有苗都帶蟲。這是常規(guī)的思維方式,但是在水產(chǎn)苗種的抽樣檢測中需要調(diào)整思維。按照相關(guān)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn),只要出現(xiàn)過一次陽性,檢測結(jié)果就應(yīng)報(bào)陽性,但這并不代表池中每一只苗都是陽性,只是該池中有帶蟲苗。所以,如果你看到的結(jié)果是陽性,那一種可能是全池苗都是陽性,第二種是只有部分或者少部分苗是陽性,至少說該池中存在陽性的苗。如果檢測結(jié)果是陰性,只是檢測的樣品蝦苗不帶蟲,不代表這個(gè)池其他蝦苗一定沒有蟲。但是,因?yàn)槭请S機(jī)抽樣,一次抽取的樣品沒有抽到陽性苗,說明該池中蝦苗的陽性率不高或者就是全陰性。

| 關(guān)于檢測工作質(zhì)量的問題 |

影響檢測結(jié)果的因素比較多,檢測人員、檢測方法、檢測儀器、檢測環(huán)境、檢測試劑都會(huì)影響檢測結(jié)果。只有檢測方法一致了檢測結(jié)果才可放在一起比較,所以檢測一定要采用標(biāo)準(zhǔn)方法實(shí)施,檢測工作要經(jīng)過認(rèn)證,檢測過程中所有的儀器要經(jīng)過校準(zhǔn)。除了檢測具體方法外,檢測樣品的數(shù)量也是影響結(jié)果的重要影響因素,可能一次一個(gè)樣品和一次一百個(gè)樣品的樣品結(jié)果可能有不同。所以,國家規(guī)定對于從事檢測工作并向社會(huì)出具具有證明作數(shù)據(jù)、結(jié)果的機(jī)構(gòu)必須進(jìn)行資質(zhì)認(rèn)定,并不是所有具有分析能力的實(shí)驗(yàn)室都能獲得檢驗(yàn)檢測資質(zhì)。

檢測儀器對檢測的結(jié)果影響較大,包括PCR儀在內(nèi)的肝腸胞蟲檢測過程中用到的所有計(jì)量儀器必須經(jīng)過法定部門的校準(zhǔn),才能確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確。如果不知道檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)的儀器是不是經(jīng)過校準(zhǔn),怎么能相信檢測結(jié)果呢?就像買了稱回來就拿來做公平稱,稱都沒有校準(zhǔn),能公平嗎?因此需要關(guān)注檢測的樣品數(shù)量、檢測方法、檢測環(huán)境是不是規(guī)范等。如果實(shí)驗(yàn)室沒有經(jīng)過資質(zhì)認(rèn)定,檢測環(huán)境就有可能被污染,檢測假陽性的情況是經(jīng)常出現(xiàn)的。

談檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度,不是單看一臺(tái)普通PCR儀器,而是整個(gè)方法的準(zhǔn)確性,這包括了檢測儀器是否校準(zhǔn)、樣品的前處理方法和時(shí)間、樣品的數(shù)量、檢測采用的引物、PCR擴(kuò)增的時(shí)間和循環(huán)次數(shù)、檢測流程等等。只有這些內(nèi)容確認(rèn)了,才能確保檢測結(jié)果的公正、客觀、科學(xué)。

檢測報(bào)告是檢測行為的終產(chǎn)品,報(bào)告的形式是有規(guī)定的,因?yàn)闄z測結(jié)果與檢測人員、檢測方法、檢測環(huán)境、使用的儀器等相關(guān),檢測結(jié)果出具時(shí)應(yīng)同時(shí)注明以上信息,并有專門人員復(fù)核和簽發(fā),這樣的結(jié)果才可以采納。缺乏以上信息的孤立結(jié)果應(yīng)謹(jǐn)慎參考。(就像說上班用了多長時(shí)間,這與是騎車、步行還是開車的,是下雨天還是風(fēng)天,路程多遠(yuǎn)等因素有關(guān),如果只告訴我們用了1個(gè)小時(shí),而沒有告訴我們其他信息,那這個(gè)1個(gè)小時(shí)的數(shù)據(jù)就沒有意義了。)

因此,同一批次蝦苗的不同樣本,出現(xiàn)兩個(gè)不同檢測結(jié)果是可能的。如果是因?yàn)闄z測工作質(zhì)量的問題,那檢測結(jié)果就不可信。如果是樣品本身代表性的問題,那我們應(yīng)該去科學(xué)認(rèn)識(shí)。廣大養(yǎng)殖戶在采購苗種的時(shí)候一定注意查看檢測報(bào)告,真正理解檢測的結(jié)果,科學(xué)利用檢測結(jié)果。

檢測的意義是讓養(yǎng)殖戶了解這里面是不是有陽性苗,如果報(bào)告為陽性,表明該池中檢測到了肝腸胞蟲,無論是全池苗帶蟲還是部分苗帶蟲,都是養(yǎng)殖戶不歡迎的蝦苗。養(yǎng)殖戶參考檢測結(jié)果去采購蝦苗可以較大程度上降低養(yǎng)殖風(fēng)險(xiǎn)。檢測結(jié)果為陰性,在規(guī)范抽樣和檢測的樣品數(shù)量下,其中陽性蝦苗數(shù)量相對較低或者沒有,風(fēng)險(xiǎn)也比沒有檢測過的苗要小很多。

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