在進行任何一種蛋白質純化的時候,都要時刻注意維護它的穩(wěn)定性,保護它的活性,有一些通用的注意事項需要牢記,它們包括:
1、操作盡可能置于冰上或者在冷庫內進行。
2、不要太稀,蛋白濃度維持在μg/mL~mg/mL。
3、合適的pH,除非是進行聚焦層析,所使用的緩沖溶液pH避免與pI相同,防止蛋白質的沉淀。
4、使用蛋白酶抑制劑,防止蛋白酶對目標蛋白的降解;在純化細胞中的蛋白質時,加入DNA酶,降解DNA,防止DNA對蛋白的污染。
5、避免樣品反復凍融和劇烈攪動,以防蛋白質的變性。
6、緩沖溶液成分盡量模擬細胞內環(huán)境。
7、在緩沖溶液中加入0.1~1mmol/LDTT(二硫蘇糖醇)(或β-巰基乙醇),防止蛋白質的氧化。
8、加1~10mmol/LEDTA金屬螯合劑,防止重金屬對目標蛋白的破壞。
9、使用滅菌溶液,防止微生物生長。提供植物有機養(yǎng)分檢測、無機養(yǎng)分檢測、植物常量元素檢測、植物微量元素檢測、植物常量元素檢測 、植物元素化學形態(tài)分析、植物亞細胞組分元素分析、植物金屬元素分析等。