活體動(dòng)物體內(nèi)光學(xué)成像主要采用生物發(fā)光與熒光兩種技術(shù)。生物發(fā)光是用熒光素酶基因(Luciferase)標(biāo)記細(xì)胞或DNA,而熒光技術(shù)則采用綠色熒光蛋白、紅色熒光蛋白等熒光報(bào)告基因和FITC、Cy5、Cy7等熒光素及量子點(diǎn)(quantumdot,QD)進(jìn)行標(biāo)記。
小動(dòng)物活體成像技術(shù)是采用高靈敏度制冷CCD配合特制的成像暗箱和圖像處理軟件,使得可以直接監(jiān)控活體生物體內(nèi)的細(xì)胞活動(dòng)和基因行為。通過(guò)對(duì)同一組實(shí)驗(yàn)對(duì)象在不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行記錄,跟蹤統(tǒng)一觀察目標(biāo)(標(biāo)記細(xì)胞及基因)的移動(dòng)及變化。操作簡(jiǎn)單、所得結(jié)果直觀、靈敏度高,已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)研究及藥物開(kāi)發(fā)等發(fā)面。
活體熒光成像技術(shù)標(biāo)記方法
1. 熒光蛋白標(biāo)記:適用于標(biāo)記細(xì)胞、病毒、基因等,通常使用的是GFP、EGFP、RFP(DsRed)等;
2. 熒光染料標(biāo)記:常用的有Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7,可以標(biāo)記抗體、多肽、小分子藥物等;
3.量子點(diǎn)標(biāo)記:主要應(yīng)用在活細(xì)胞實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)熒光觀察與成像,可以在長(zhǎng)達(dá)數(shù)天內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞的分化和世系觀察,以及細(xì)胞間、細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞器間的各種相互作用的原位實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)示蹤。不但如此,量子點(diǎn)還可以標(biāo)記在其他需要研究的物質(zhì)上,如藥物、特定的生物分子等,示蹤其活動(dòng)及作用。
實(shí)驗(yàn)流程
1.制作動(dòng)物模型
2.細(xì)胞標(biāo)記或動(dòng)物標(biāo)記
3.活體成像
4.數(shù)據(jù)處理
應(yīng)用領(lǐng)域
腫瘤學(xué)
建立腫瘤模型,通過(guò)活體成像技術(shù)可以測(cè)量腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移以及對(duì)藥物的反應(yīng),使腫瘤學(xué)更接近臨床的發(fā)病的微觀環(huán)境。相比傳統(tǒng)方法,不僅靈敏度提高(檢測(cè)到微小腫瘤病灶),而且適合于腫瘤體內(nèi)生長(zhǎng)的定量分析,避免由于宰殺老鼠而造成的組間差異。
藥物研究
通過(guò)活體成像技術(shù)可研究與藥物代謝有關(guān)的基因,藥物作用通路以及藥物的靶向臟器和體內(nèi)分布規(guī)律。
實(shí)驗(yàn)交付
客戶提供:
1.客戶需自行提供活體成像實(shí)驗(yàn)涉及的動(dòng)物、試劑等(如無(wú)可由本公司代購(gòu))
2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的具體的要求和注意事項(xiàng);
3.提供熒光素酶基因(Luciferas)或者熒光物質(zhì)的具體信息。
我們提供:
實(shí)驗(yàn)記錄報(bào)告,含所需試劑耗材、儀器設(shè)備、操作過(guò)程。