實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種在DNA擴(kuò)增反應(yīng)中,以熒光化學(xué)物質(zhì)測(cè)每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法。通過(guò)內(nèi)參或者外參法對(duì)待測(cè)樣品中的特定DNA序列進(jìn)行定量分析的方法。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是實(shí)驗(yàn)室最常用的實(shí)驗(yàn),是一次由定性技術(shù)向定量技術(shù)的飛躍,運(yùn)用該項(xiàng)技術(shù),可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行相對(duì)定量、絕對(duì)定量和定性分析。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)以其特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好、定量準(zhǔn)確、速度快、全封閉反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn),提高了普通PCR技術(shù)的特異性和準(zhǔn)確性,成為了分子生物學(xué)研究中的重要工具。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)應(yīng)用范圍:
1)目的基因相對(duì)表達(dá)差異分析(2-△△Ct);
2)miRNA檢測(cè);
3)基因型分析;
4)轉(zhuǎn)基因生物(GMO檢測(cè));
5)細(xì)胞治療藥物組織分布檢測(cè);
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)優(yōu)勢(shì):
1)靈敏度高,可以檢測(cè)低拷貝的目的基因;
2)高精度,PCR擴(kuò)增階段包括3個(gè)階段:指數(shù)增長(zhǎng)期、線(xiàn)性增長(zhǎng)期和平臺(tái)期、96個(gè)重復(fù)指數(shù)增長(zhǎng)期表現(xiàn)出高精度,而平臺(tái)期則變化差異較大;
3)定量能力強(qiáng),簡(jiǎn)單的流程就能得到高質(zhì)量的定量數(shù)據(jù);
4)動(dòng)力學(xué)范圍寬,可以精確定量9個(gè)數(shù)量級(jí)的差異;
5)速度快,節(jié)省時(shí)間和勞力,不需要電泳檢測(cè);
6)安全,使用熒光染料發(fā)光,不用EB或放射性物質(zhì),極大降低對(duì)實(shí)驗(yàn)人員健康的威脅;
菲優(yōu)特檢測(cè)利用專(zhuān)業(yè)實(shí)時(shí)熒光定量PCR平臺(tái),開(kāi)展一系列分子生物學(xué)研究實(shí)驗(yàn)服務(wù):
1)在您開(kāi)始實(shí)驗(yàn)之前,本公司將為竭誠(chéng)您提供最有效的熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)方案;
2)mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA、SNP表達(dá)檢測(cè);
3)基因拷貝數(shù)檢測(cè)(土壤中細(xì)菌、真菌、固氮菌等含量的檢測(cè)和功能基因檢測(cè));
4)接受采用熒光定量PCR的檢測(cè)方法針對(duì)各種檢測(cè)目標(biāo)的合作研發(fā)和委托研發(fā);
實(shí)時(shí)熒光定量服務(wù)流程:
樣品核酸提取、PCR引物設(shè)計(jì)與合成-引物調(diào)試(預(yù)實(shí)驗(yàn))-PCR擴(kuò)增檢測(cè)-數(shù)據(jù)匯總初步分析
菲優(yōu)特檢測(cè)實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)優(yōu)勢(shì)
1)免費(fèi)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案;
2)嚴(yán)格按照SOP進(jìn)行實(shí)驗(yàn),數(shù)據(jù)真實(shí)準(zhǔn)確;
3)豐富的引物設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn),保證引物特異性;
4)完善的樣本管理流程,保證客戶(hù)樣本質(zhì)量;
5)嚴(yán)格的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn),保證提取DNA/RNA質(zhì)量;
6)QPCR檢測(cè)時(shí),保證每個(gè)樣本2~3個(gè)平行對(duì)照,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確;
7)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后3天內(nèi),反饋客戶(hù)檢測(cè)數(shù)據(jù)及報(bào)告。