MTT檢測實(shí)驗(yàn)方法概述
MTT為黃色化合物,是一種接受氫離子的染料,在活細(xì)胞中作用于線粒體的呼吸鏈,MTT在琥珀酸脫氫酶和細(xì)胞色素C的作用下生成藍(lán)色的formazan結(jié)晶,formazan結(jié)晶的生成量與活細(xì)胞數(shù)目成正比,生成的formazan結(jié)晶可溶解在DMSO中,利用酶標(biāo)儀測定570 ?nm處的光密度OD值,可以反映出活細(xì)胞數(shù)目和細(xì)胞活力。死細(xì)胞中由于沒有琥珀酸脫氫酶,因此不能還原MTT生成formazan結(jié)晶。
特定藥物經(jīng)MTT實(shí)驗(yàn)檢測相關(guān)抗癌活性、經(jīng)特定細(xì)胞模型檢測細(xì)胞抗氧化損傷活性、篩選藥物最佳作用濃度方便后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究。
MTT檢測應(yīng)用范圍
1、檢測細(xì)胞活性:常作為細(xì)胞毒性試驗(yàn)的一種方法。
2、體外藥物敏感實(shí)驗(yàn):該方法簡便、經(jīng)濟(jì)、快速,重復(fù)性好,所需的細(xì)胞數(shù)較少,沒有放射性,目前廣泛的用于臨床前的抗癌藥物的篩選研究。
3、一些細(xì)胞因子活性的研究
MTT檢測技術(shù)服務(wù)內(nèi)容
1、細(xì)胞培養(yǎng)與接種;
2、處理(如藥物處理等);
3、MTT檢測及數(shù)據(jù)分析;
4、技術(shù)服務(wù)報(bào)告提交。
MTT檢測實(shí)驗(yàn)服務(wù)報(bào)告內(nèi)容
1、MTT實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)及分析結(jié)果,如曲線圖、IC50等;
2、MTT技術(shù)服務(wù)所需試劑耗材、儀器設(shè)備、實(shí)驗(yàn)方法各一份。