藻類多糖對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究：
1、在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC上用MTT實(shí)驗(yàn)篩選過氧化氫作用濃度(50um、100um、200um、400um、800um)；MTT實(shí)驗(yàn)篩選出滸苔多糖、褐藻多糖硫酸酯、褐藻膠寡糖(50 ug/ml、100 ug/ml、200 ug/ml、400 ug/ml、800ug/ml)最適藥物濃度以及過氧化氫給予刺激時(shí)間點(diǎn)篩選(12h、24h和36h)；
2、選取其中一種藥物加入人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC中，并設(shè)置正常組、模型組和加藥組，加藥2h后給與過氧化氫刺激：
①流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡；
②Hoechst33342細(xì)胞染色觀察細(xì)胞形態(tài)；
③SOD實(shí)驗(yàn)和ROS實(shí)驗(yàn)檢測酶活性；
④收集細(xì)胞樣品提取核酸后分別用普通PCR和熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)檢測Bax、Bcl-2、caspase-3的表達(dá)量；
⑤收集細(xì)胞樣品制備成蛋白樣品用Westorn blot實(shí)驗(yàn)檢測pERK1/2、tERK1/2、pJNK1/2、tJNK1/2蛋白表達(dá)量。
本平臺合作項(xiàng)目
分子診斷、藥效學(xué)評價(jià)、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞藥篩、動物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因編輯、病理檢測、基因芯片、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析!
