研發(fā)服務(wù)
反轉(zhuǎn)錄PCR(Reverse Transcription,RT-PCR)又稱為逆轉(zhuǎn)錄PCR。其原理是:提取組織或細(xì)胞中的總RNA,以其中的mRNA作為模板,采用Oligo(dT)或隨機(jī)引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成cDNA。再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增,而獲得目的基因或檢測(cè)基因表達(dá)。
RT- PCR即逆轉(zhuǎn)錄PCR,是將RNA的逆轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增反應(yīng)(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。RT-PCR技術(shù)靈敏而且用途廣泛,可用于檢測(cè)細(xì)胞/組織中基因表達(dá)水平,細(xì)胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列等。RT-PCR使RNA檢測(cè)的靈敏性提高了幾個(gè)數(shù)量級(jí),使一些極為微量RNA樣品分析成為可能,該技術(shù)主要用于:分析基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物、獲取目的基因、合成cDNA探針、構(gòu)建RNA高效轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)。
反轉(zhuǎn)錄PCR服務(wù)流程
1、mRNA抽提
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA第一鏈
3、PCR擴(kuò)增雙鏈cDNA
4、純化PCR產(chǎn)物,克隆PCR產(chǎn)物到標(biāo)準(zhǔn)載體測(cè)序
5、亞克隆到其他表達(dá)載體(可選)
菲優(yōu)特檢測(cè)秉承“科學(xué) · 獨(dú)立 · 誠信 · 高效”的服務(wù)理念,以專業(yè)、專注的態(tài)度為您提供精確的檢測(cè)技術(shù)和咨詢、科研服務(wù)。