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構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系的基本原理是將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上,載體被轉(zhuǎn)染到宿主細(xì)胞并整合到宿主染色體中,用載體中所含的抗性標(biāo)志進(jìn)行篩選。穩(wěn)定細(xì)胞株的構(gòu)建周期長、難度大,每一步都很關(guān)鍵,尤其是細(xì)胞轉(zhuǎn)染,常用物理方法(電轉(zhuǎn))、化學(xué)方法(脂質(zhì)體等)、生物方法(病毒),根據(jù)不同的實驗條件,選擇最好的方法,來達(dá)到實驗?zāi)康摹?/span>
菲優(yōu)特檢測是您在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的專業(yè)合作伙伴,為您的細(xì)胞操作實驗提供專業(yè)的、可靠的解決方案。
菲優(yōu)特檢測生物團(tuán)隊提供哺乳動物穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建服務(wù),與瞬時轉(zhuǎn)染不同,穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建是指外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞并整合到細(xì)胞的染色體上,使宿主細(xì)胞可長期表達(dá)目的基因,穩(wěn)定細(xì)胞株表達(dá)的蛋白/抗體穩(wěn)定性更好和批次差異性更小。
構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系最常用的真核表達(dá)載體的抗性篩選標(biāo)志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418來代替新霉素進(jìn)行選擇性篩選,得到可穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白,或者穩(wěn)定表達(dá)沉默特定基因的細(xì)胞株。
菲優(yōu)特檢測秉承“科學(xué) · 獨立 · 誠信 · 高效”的服務(wù)理念,以專業(yè)、專注的態(tài)度為您提供精確的檢測技術(shù)和咨詢、科研服務(wù)。