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原代細(xì)胞分離與培養(yǎng)

原代細(xì)胞是來源于胚胎、組織器官及外周血樣本經(jīng)特殊實(shí)驗(yàn)方法處理而制備的原初培養(yǎng)細(xì)胞,這一過程被稱為原代細(xì)胞分離。原代細(xì)胞具有保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì),如果是正常細(xì)胞,仍然保留二倍體數(shù)。

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細(xì)胞的分離純化和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。原代細(xì)胞培養(yǎng)是指將組織從動(dòng)物體內(nèi)取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA) 或機(jī)械方法剪碎處理,分散成單細(xì)胞,在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖的過程。

原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)項(xiàng)目
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞原代培養(yǎng)小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞原代分離培養(yǎng)細(xì)胞傳代培養(yǎng)
大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的原代培養(yǎng)心肌成纖維細(xì)胞(CFs)原代培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)
大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞原代培養(yǎng)骨髓內(nèi)皮組細(xì)胞原代培養(yǎng)胃上皮細(xì)胞培養(yǎng)
脂肪/骨髓/牙源間充質(zhì)干細(xì)胞小鼠海馬/大鼠脊髓神經(jīng)元細(xì)胞神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)
人眼眶/大鼠心肌成纖維細(xì)胞乳鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)操作滑膜細(xì)胞原代培養(yǎng)
牛視網(wǎng)膜/小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞大白兔/大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞小鼠巨噬、小膠質(zhì)/大鼠肝細(xì)胞

 原代細(xì)胞分離與培養(yǎng)方法 

懸浮細(xì)胞的分離方法:組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

實(shí)體組織材料的分離方法:對(duì)于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

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