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蛋白表達(dá)與純化

原核蛋白表達(dá)是將植物、動(dòng)物、微生物等目的基因插入合適載體后導(dǎo)入大腸桿菌表達(dá)出大量目的蛋白,這種方法在蛋白純化、定位及功能分析等方面都有應(yīng)用。蛋白表達(dá)技術(shù)包括原核蛋白表達(dá)與純化、酵母蛋白表達(dá)與純化、昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)與純化、哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)與純化。原核蛋白表達(dá)系統(tǒng)是成熟可靠的蛋白表達(dá)系統(tǒng),能快速表達(dá)純化各種不同來源蛋白,所制備的重組蛋白可用于藥物篩選、結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究、細(xì)胞生物學(xué)研究、蛋白質(zhì)組學(xué)研究等的一系列生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究。

為了保證蛋白純化的質(zhì)量,菲優(yōu)特檢測(cè)生物團(tuán)隊(duì)建立了嚴(yán)格的產(chǎn)品質(zhì)控體系及一整套完善的客戶服務(wù)流程、保密制度,以確保為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及成熟的服務(wù)。根據(jù)客戶的需求,提供從基因合成,載體構(gòu)建,基因表達(dá),蛋白純化、檢測(cè)等一站式服務(wù),菲優(yōu)特檢測(cè)生物團(tuán)隊(duì)在優(yōu)化基因密碼子、表達(dá)載體的設(shè)計(jì)和構(gòu)建、融合對(duì)象和標(biāo)簽的選取、特定蛋白純化系統(tǒng)的選擇、蛋白生產(chǎn)工藝的優(yōu)化等方面,擁有較多的經(jīng)驗(yàn),可以滿足客戶個(gè)性化的需求。

選擇菲優(yōu)特理由1.jpg

 原核蛋白表達(dá)(E. coli )技術(shù)服務(wù)內(nèi)容 

1、基因合成

提供客戶:合成的基因及測(cè)序序列。

2、載體構(gòu)建(表達(dá)載體的設(shè)計(jì)和構(gòu)建、融合對(duì)象和標(biāo)簽的選取。)

擴(kuò)增并抽提構(gòu)建好的表達(dá)質(zhì)粒。 將表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到高效的E. coli表達(dá)菌株中。 至少挑選數(shù)個(gè)陽性克隆于LB培養(yǎng)基中擴(kuò)增并誘導(dǎo)表達(dá)目標(biāo)蛋白。 電泳檢測(cè),菌株中目標(biāo)蛋白的表達(dá)情況,并挑選合適的單克隆菌株用于目標(biāo)蛋白的表達(dá)。

提供客戶:重組質(zhì)粒的表達(dá)菌株及表達(dá)檢測(cè)報(bào)告。

3、搖瓶培養(yǎng)重組細(xì)菌,誘導(dǎo)表達(dá)目標(biāo)蛋白

通過親和、離子交換、疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

利用蛋白酶去除不需要的純化標(biāo)簽(Tag),再純化獲得所需的目標(biāo)蛋白(可選,構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)需加入合適的蛋白酶切位點(diǎn))。

通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

提供客戶:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)95%以上。

4、大規(guī)模蛋白制備

蛋白生產(chǎn)工藝的優(yōu)化

提供客戶:合格的目標(biāo)蛋白及服務(wù)報(bào)告。

5、蛋白復(fù)性服務(wù)

利用不同復(fù)性緩沖液的體系,對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行小量復(fù)性試驗(yàn)提供復(fù)性后樣品供客戶檢測(cè)。 可根據(jù)客戶要求,按照其中一種樣品的復(fù)性條件制備小量的復(fù)性蛋白。強(qiáng)耀生物科技有限公司可提供具體的復(fù)性緩沖液配方及復(fù)性工藝。

其他:除菌,凍干等進(jìn)一步加工。

提供客戶:加工后的最終產(chǎn)品及相關(guān)實(shí)驗(yàn)和檢測(cè)報(bào)告。

菲優(yōu)特檢測(cè)秉承“科學(xué) · 獨(dú)立 · 誠(chéng)信 · 高效”的服務(wù)理念,以專業(yè)、專注的態(tài)度為您提供精確的檢測(cè)技術(shù)和咨詢服務(wù)。

客戶.png檢測(cè)流程.png送檢流程.png

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