研發(fā)服務(wù)
利用熒光探針DCFH-DA進(jìn)行活性氧的檢測。DCFH-DA本身沒有熒光,可以自由穿過細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后,可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細(xì)胞膜,從而使探針很容易被裝載到細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF,檢測DCF的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。
| 實驗流程
Step1:制成單細(xì)胞懸液(組織樣本)
Step2:溶血(細(xì)胞樣本無需進(jìn)行此步驟)
Step3:離心去上清
Step4:調(diào)整細(xì)胞密度
Step5:加入相應(yīng)的熒光探針
Step6:孵育
Step7:洗滌后離心去上清
Step8:上機檢測
| 實驗費用 :根據(jù)客戶檢測需求以及實驗復(fù)雜程度進(jìn)行報價
| 客戶注意事項
1.標(biāo)本收集與保存
>> 組織樣品:新鮮組織放入液氮或-70度保存,組織不少于100mg(約綠豆大小);
>> 培養(yǎng)細(xì)胞:通過細(xì)胞計數(shù)取不少于2000000個細(xì)胞于EP管,加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑,混勻后保存于冰箱(-70℃,避免反復(fù)凍融);
>> 血液細(xì)胞標(biāo)本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細(xì)胞分離液分離細(xì)胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑,保存(-70℃可長期保存,避免反復(fù)凍融);
>> 血清或細(xì)胞培養(yǎng)液標(biāo)本:離心去掉雜質(zhì)后取上清入EP管,保存(以上4℃可保存15-20天,-70℃可長期保存,避免反復(fù)凍融)。
2.樣本運輸:可選以下任何的一種方式寄送標(biāo)本
>> 組織樣本、細(xì)胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護劑后加冰袋運輸;
>> 細(xì)胞樣本也可以直接快件寄送培養(yǎng)瓶(密封保證不污染,培養(yǎng)液不漏出,細(xì)胞不要長得太滿,50%左右,灌滿培養(yǎng)液);
>> 血清或上清液直接加冰袋寄送(密封保證液體不漏出,視路途遠(yuǎn)近2-3天可到達(dá))。
| 送檢與交付標(biāo)準(zhǔn)
樣品類型 | 樣品需求 | 運輸條件 |
組織 | 離體后組織制成單細(xì)胞懸液,加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運輸 |
活細(xì)胞 | 樣本量:1*106個細(xì)胞/TEST,加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運輸 |
血液 | 將血液采集在EDTA肝素鈉的抗凝采血管內(nèi) | 常溫運輸 |